- 更新時間2021-04-15
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紫外分光光度計由光源、單色器、吸收池和檢測器四部分組成。分析時當特定強度的入射光束(Incident beam)通過裝有均勻待測物的介質(zhì)時，該光束將被部分吸收，未被吸收的光將透過(Emergent)待測物溶液以及通過散射(Scattering)、反射(Reflection)，包括在液面和容器表面的反射)而損失，這種損失有時可達10%，在樣品測量時必須同時采用參比池和參比溶液扣除這些影響。當入射光波長一定時，待測溶液的吸光度與其濃度和液層厚度成正比（Lambert-Beer定律）。
紫外分光光度計的定量分析方法包括以下幾種：
1.絕d法
這是紫外分光光度計諸多分析方法中使用多的一種。這是一種以比耳定律A=εbc為基礎(chǔ)的分析方法。某一物質(zhì)在一定波長下的ε值是一個常數(shù)，石英比色皿的光程是已知的，也是一個常數(shù)。因此，可用紫外可見分光光度計在λmax波長處，測定樣品溶液的吸光度值A(chǔ)。然后，根據(jù)比耳定律c=A/(εb)，則可求得該樣品溶液的含量或濃度。
2.標準法
在相同的測試條件下，分別測試標準樣品溶液c標和被測試樣品溶液（樣的吸光度A標和A樣）。然后，按公式求得樣品溶液的濃度或含量。
3.比吸收系數(shù)法
由于紫外線可見分光光度計的雜散光、噪聲、基線平直度和光譜帶寬以及試樣的前處理、玄年的化學(xué)平衡等所引起的。因此，一般情況下不采用這種方法。
4.曲線法
標準曲線法是常用的定量分析方法。首先，用標準物質(zhì)配制一定濃度的溶液，然后，將該溶液配制成一系列的標準溶液。在一定波長下，測試每個標準溶液的吸光度，以吸光度值為縱坐標標準溶液對應(yīng)的濃度值為橫坐標，繪制標準曲線。后將樣品溶液按標準曲線繪制程序測得吸光度值，在標準曲線上查出樣品溶液對應(yīng)的濃度或含量。
